- 光遗传学光遗传学 兴奋性光遗传学 抑制性Bistable optoGPCR
- 药物遗传学药物遗传学 兴奋性药物遗传学 抑制性药物遗传学 其他
- 钙离子探针
- 其他探针神经递质探针膜电压探针pH探针其它小分子探针
- CRISPR/Cas系统spCas9saCas9
- 重组酶CreFlpDreVCre
- Rabies Virus Helper
- 细胞凋亡/杀伤/细胞控制细胞凋亡/杀伤神经元突触抑制非受控细胞激活型非受控细胞抑制型
- 诱导表达系统四环素诱导表达光诱导表达
- 疾病造模神经疾病造模代谢疾病造模原发肿瘤造模
- 对照和荧光蛋白RNAi 基因干扰荧光蛋白分离荧光蛋白免疫标记亚细胞标记显色发光标记
- 其他TRAP（translating ribosome affinity purification）神经元顺逆标
- AAV腺相关病毒载体AAV2/1AAV2/2AAV2/2PlusAAV2/1x2AAV2/4AAV2/5AAV2/6AAV2/6PlusAAV2/6.2FFAAV2/8AAV2/9AAV2/2RetroAAV2/2Retro PlusAAV2/PHP.SAAV2/PHP.eBAAV2/DJ8AAV2/DJAAV2/Bi30AAV2/BR1AAV2/ieAAV2/8R12AAV2/Anc80L65AAV2/PRAAV2/Ark313AAV2/MaCPNS1AAV2/MaCPNS2AAV2/Olig001AAV2/CPP.16AAV2/MG1.2AAV2/CAP-B1AAV2/Rec2AAV2/CAP-B10AAV2/CAP-MacAAV2/11AAV2/ieAAV2/CAP-MacAAV2/9-X1.1AAV2/innate01AAV2/MyoAAV-2A肝细胞特异表达心肌细胞特异表达神经元环路研究工具scAAV 双链AAV
- LV慢病毒载体
- AdV5腺病毒载体
- CAV2犬腺病毒载体
- 逆转录病毒载体 Retrovirus
- Rabies Virus狂犬病毒载体
- 质粒载体
- 生化试剂盒
- AAV2/5;RNAi 基因干扰shRNA
- hAdV5
- AAV2/Bi30
- AAV2/1
- AAV2/PHP.eB
- AAV2/6.2FF
- AAV2/CAPMac
- AAV2/2
- AAV2/1x2
- AAV2/4
- AAV2/ie
- AAV2/rh10
- AAV2/innate04
- AAV2/Retro
- AAV2/2Retro
- AAV2/MaCPNS1
- AAV2/MG1.2
- AAV2/8
- AAV2/B10
- AAV2/9
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- AAV2/5
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- AAV2/5;光诱导表达
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- AAV2/9;光遗传学 兴奋性
- AAV2/5;光遗传学 抑制性
- AAV2/9;重组酶
- AAV2/9;CRISPR/Cas系统spCas9
- AAV2/9;药物遗传学 抑制性
- AAV2/MaCPNS1;钙离子探针
- AAV2/8;RNAi 基因干扰Mir30based
- AAV2/5;荧光蛋白
- AAV2/5;重组酶
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泰原研|好久不见，泰大V携超低泄露的DIO2现身，“毒王”归来！182
发表时间：2020-10-15 11:18 点击上方蓝字关注我们 审DIO 升堂，带犯人！ ！！ (众衙役（泰小V）:威~武~) DIO，有客户状告你有泄露的问题，你可知罪？ 冤枉啊！大人！比起LSL结构，我哪里算得上泄露！ 虽然你比LSL泄漏少，但并不能证明你不泄露。不过我倒想了解一下你是如何做到比LSL泄露更少的？ 我这个设计中目的基因跟启动子是反向的，载体转录出来的mRNA上不会翻译出目的基因。 也就是没有Cre绝对不会翻转？ 大人… 实际上因为Lox序列之间的同源性，质粒在细菌中复制过程中，会有一定的几率发生重组，使得最后抽提得到的质粒中有一定比例（约1/1000）的质粒是已经发生重组的 可以避免吗？据我所知，Stbl3等感受态可以减少重组。 很遗憾，像Lox这种小于50个碱基的序列重组并不是RecA蛋白介导的，所以即使用Stbl3感受态也没办法解决问题。  这个问题虽然是细菌复制造成的，但跟你的结构也有关系，难道没有解决方案？ 方法倒是有，可以通过减少配对的Lox序列中的同源性，通常设计中发生重组的是完全一样的34bplxo序列。有一些非对称的Lox对，它们序列不完全相同，但能够发生重组，比如Lox66和Lox71这对。由于它们序列不太相同，重组发生几率会降低。
虽然Lox序列可以做这样的改进，但似乎fDIO或dDIO中用的frt和rox序列还没有这样的互补对。 是的。 如你所说，目的基因跟启动子方向相反，转录出来的mRNA不会表达目的基因。不过目的基因所在链就不会转录mRNA吗？ 这...... AAV感染后会转变为双链形式，不同AAV单体间会发生连接，有的是头尾相连，有的是头头相连，这可能会导致串联出现的episome上，在不同AAV上的目的基因和启动子的方向是一致的。 大人英明！Callaway实验室已证明这种方法出现的泄露，比Lox非特异重组造成泄露会更严重。 有解决方案吗？ 可采用ATG-OUT的构建方式，将ATG和目的基因的ORF放在Lox序列两侧，也就是如果未发生重组，目的基因不是完整的，即使目的基因所在链有转录发生，也不会翻译出有功能的蛋白。
但如果Lox序列在ATG和阅读框之间，岂不是Lox也会翻译成氨基酸序列？ 是的，大人。所以这个方式不太适合表达膜蛋白等分子。 那如果把Lox序列放在内含子中呢？ 这是很好的设计，但仍然可能会存在问题。正如您所说，其他AAV上的启动子会转录目的基因，长距离的内含子剪切也是有可能的。 泰大V紧皱的眉头已舒展开，说到： DIO，本官已基本查清事实真相，念你在大多数条件下能够满足实验所需，准许你为科研继续提供服务。泰小V何在？ 在，大人！ 现命你开发新版本的DIO载体，解决特殊条件下泄露造成的问题！ 领命！！！ 下面，我们来领略下新版DIO的魅力吧！ 在RCF-tdTomato x PvalbCre（上图）和RCF-tdTomato （下图）初级视皮层注射等量的AAV-nef-DIO-Flp（左图）和AAV-nef-DIO2-Flp（右图）后的脑组织切片图。（图片来自参考文献） 截止目前，泰儿图已经研发出如下几种现货，同时接受DIO2相关病毒的定制，如果有需要，请和当地销售工程师联系。
参考文献：https://www.pnas.org/content/116/52/27001 往期文章： 泰新品 | 告别单色世界，新一代多彩钙指示剂XCaMP上市 泰新品 | 逆标神器上新啦！慢病毒也可以玩转神经环路 泰新品 | 红光钙指示剂jRCaMP1喜气盈门，盘它！ 泰新品 | Soma-Targeting元件，补完GtACR载体的缺陷 泰新品 | 新一代 jGCaMP7b 钙成像载体强势登场！ 泰新品 | 对不起，这款产品要涨价了 泰新品 | dLight1精准点亮多巴胺，神经环路研究的探针时代降临？ 泰新品 | 网红载体mDlx上市，标记GABA能中间神经元 中国最大病毒载体现货库 青年学术咖研发交流平台
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